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乳酸(Lactic acid，LD)又称2-羟基丙酸是一种化合物，是一种含有羟基的羧酸，分子式是C3H6O3，是糖无氧氧化（糖酵解）的代谢产物，产生于骨骼、肌肉、脑和红细胞，经肝脏代谢后由肾分泌排泄，参与生物化学很多反应过程。
乳酸检测试剂盒以NAD为氢受体，LDH催化乳酸脱氢生成丙酮酸，使NAD转化为NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物，呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。
本试剂盒适用于检测血清、组织、发酵液、细胞、培养液等中的乳酸的含量。
本试剂盒不可以测定全血样本。需要测定全血样本可以选择其它货号的试剂盒产品。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
● 530nm酶标仪● 37℃恒温水浴锅● 涡旋混匀器● 移液器● 生理盐水● 蛋白定量试剂盒

组份	500T
组分A：酶稀释液	60mL
组分B：酶储备液	0.6mL
组分C：试剂C	6mL×2瓶
组分D：粉末D	2支
组分E：终止液	60mL×2瓶
组分F：标准品（3mmol/L）	2mL

试剂D -20℃保存；其余2～8℃避光。有效期6个月。


● 血清、血浆、组织等样本应新鲜，或者于-80℃以下保存半年以内检测；
● 严重溶血及黄疸会使检测结果偏高；
● 在批量实验前需进行预实验，以确定测定绝对OD（测定OD-空白OD）在0.05～0.35之间。如果测定绝对OD小于0.05，则需加大样本浓度重新测定；如果测定绝对OD大于0.35，则需要将样本稀释后重新测定。


试剂配制：
1.酶工作液的配制：
按试剂A（酶稀释液）：试剂B（酶储备液）=100：1配制，用多少配多少，配好后充分混合后待用，现用现配，24小时内有效。
2.显色工作液的配制：
使用前将试剂D，1支倒入1瓶试剂C中，待粉末全部溶解后，充分混匀溶解，即为显色工作液。2～8℃避光保存2周内有效。
注：
● 待粉末全部溶解后，用微量移液器取少许液体放入离心管中，反复颠倒离心管，再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中，如此反复2～3次，使二者充分混匀，配成显色工作液。
3.样本的前处理
（1）血清、血浆、细胞培养液等样本：
取血清（浆）、培养液用生理盐水稀释成不同浓度，按操作表做预实验，选择测定绝对OD（测定OD-空白OD）在0.05～0.35之间的浓度为最佳取样浓度。
（2）细胞/组织样本：
10%匀浆液的制备：准确称取细胞沉淀湿重/组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9的比例加入9倍体积的生理盐水。冰水浴条件下机械匀浆，充分匀浆后，在2500×g，离心10min，取上清进行测定。
注：
● 大约100μL细胞沉淀，107个细胞。
取匀浆上清液用生理盐水稀释成不同浓度，按操作表做预实验，选择测定绝对OD（测定OD-空白OD）在0.05～0.35之间的浓度为最佳取样浓度。
4.按下表在96孔板中加入试剂。
注：
● 试剂加样要准确。
● 要充分混匀。

试剂（μL）	空白管	标准管	测定管
双蒸水	2
3mmoL/L标准工作液		2
样本			2
酶工作液	100	100	100
显色工作液	20	20	20
混匀，37℃准确孵育10min
试剂E终止液	200	200	200
混匀，蒸馏水调零，530nm，测吸光度值。

注：
● 也可以将以上试剂用量加大10倍，在离心管中进行反应，反应完成后将反应吸入酶标板进行检测。
计算公式：
血清中乳酸的计算公式：
血清中乳酸含量(mmol/L)=×标准品浓度(3mmol/L)×样品测试前稀释倍数
细胞/组织中乳酸的计算公式：
=×标准品浓度(3mmol/L)÷待测样品蛋白浓度(gprot/L)
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